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無血清培養(yǎng)基的適應性解析
點擊次數(shù):498 更新時間:2021-09-08

  細胞培養(yǎng)實驗中,培養(yǎng)基有著不可取代的地位。大家知道,血清是的天然培養(yǎng)基,而無血清培養(yǎng)基也有著功不可沒的作用,被廣泛的應用于培養(yǎng)哺乳動物和無脊椎動物細胞以制備單克隆抗體,病毒抗原和重組蛋白等。遠慕生物為您分析解說無血清培養(yǎng)基在細胞培養(yǎng)實驗中的適應性:

  一、適應方法

  1.直接適應細胞從血清的培養(yǎng)基為基。

  2.連續(xù)的適應或脫機細胞從血清的培養(yǎng)基為SFM在幾個步驟。

  連續(xù)的適應往往是細胞比直接適應嚴酷少。

  二、連續(xù)的適應

  通道1,75%血清的培養(yǎng)基:25%基

  通道2,50%血清的培養(yǎng)基:50%基

  通道3,25%血清的培養(yǎng)基:75%基

  從75%到100%的變化可能是太緊張的SFM細胞,可能需要把細胞2–3通道在10%血清的培養(yǎng)基:90% SFM混合物。大多數(shù)的細胞系可以被認為是*適應后100% SFM 3通道。有時你可能會得到你過去的某一步甚至細胞之前一百% SFM有麻煩。如果發(fā)生這種情況,回去和傳代細胞2–3次血清前比補充媒體的無血清培養(yǎng)基。

  三、對無血清培養(yǎng)的思考

  總的來說,在無血清培養(yǎng)細胞的滲透壓,pH,溫度,機械力ji端敏感,酶處理。

  1.抗生素

  不要在無血清培養(yǎng)基中使用抗生素。如果你這樣做,我們建議您使用5到10倍不到你會在血清培養(yǎng)基中。這是因為血清蛋白會結合一定量的抗生素添加;沒有這些血清蛋白抗生素的水平可能是某些細胞的毒性。

  2.高密度

  細胞必須與活力> 90%適應中的生長對數(shù)期。連續(xù)的適應可能是必要的。播種文化在一個更高的密度比正常在各通道在SFM適應可以幫助過程。因為有些部分的細胞不可能在新的文化環(huán)境中生存,有更多的細胞會增加活細胞數(shù)進一步通道。

  3.叢生

  細胞聚集往往發(fā)生在適應SFM。我們建議你輕輕地成團塊打破他們當傳代細胞。

  4.形態(tài)

  這是不尋常的在適應SFM后見細胞形態(tài)略有變化。只要倍增時間和細胞活性保持良好,在形態(tài)上的細微變化,不應該是一個值得關注的理由。

  四、對培養(yǎng)的適應

  為適應SFM的另一種方法涉及使用“條件培養(yǎng)基"。介質的細胞已生長在一個完整的通道,如果您選擇這種方法,可以促進適應如下:

  通道1,100%血清的培養(yǎng)基

  通道2通道50%中從1:50左右SFM

  通道3通道50%中從2:50左右SFM

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